產品名稱:土壤羥胺還原酶ELISA試劑盒
OD值偏低由什么因素引起的?
① 整板OD值偏低:
?反應溫度偏低;
?反應時間不夠;
?洗板時間過長或次數過多;
?點板時環境溫度過低;
?酶標儀故障波長錯誤;鎢光燈壽命將近,導致光強變弱);
?試劑盒有效期已過或將過;
?某些試劑盒標準品需要稀釋才能使用或試劑稀釋倍數錯誤(如四環素類);
?試劑盒中的某些試劑變質或污染;
?不同試劑盒混用,
?試劑盒的回溫時間較短;
?試劑盒保存未按規定的方法或環境保存;
?試劑盒處于該條件下,比如放在貼著冰箱壁,試劑凍傷。
② 樣本的OD值偏低:
?樣本的陽性太高(可做空白樣本及陽性樣本對照試驗),
?某些試劑盒的樣本需要調節PH的沒有調節到需要的PH范圍;
?某些試劑盒的復溶液需要稀釋后才能使用的沒有經過稀釋;
?樣本前處理時沒有去掉上層有機相,加樣吸取到上層有機相;
?樣本被污染;
?樣本與標準品的溫度相差太多(樣本溫度低);
?樣本前處理時使用的水質量不合格;
?樣本前處理過程中所使用的試劑質量有問題(可做試劑空白對照);
產品名稱:土壤羥胺還原酶ELISA試劑盒
ELISA 試劑盒出現的問題及解決方法:
1.脂肪存在為什么會造成試驗的假陽性率比較高?
在提取過程中, 容易造成乳化, 對樣本進行不正常的濃縮,易與雜質混合難以分離。乳化后一般利用60℃水浴加熱半小時,最好是先把上層有機相去除后再利用水浴加熱較好.第二種解乳化的方法是把整個乳化后的樣本全部放入冰箱-20℃急凍室急凍30min或更長,回溫后去除上層有機相再次離心后去上清液,取下層進行分析。
如氯霉素或其他在加入正已烷再加入復溶液進行操作時,可在加入正已烷后充分渦動1-2分鐘,然后加入復溶液后渦動5-10s,即可在一定程度上防止乳化造成。又如硝基呋喃類代謝物的前處理中加入乙酸乙酯后形成乳化層,不易取到相應的量,可以在加入乙酸乙酯時,放大加入的量,然后取液相應增加,保證稀釋倍數不變,也可在一定程度上防止乳化形成。
2.樣品OD值落在藥殘標準曲線的那一區間值精確度最高?
一般在第三和第四標準之間精確度較高, 但是不同的試劑盒曲線的局部差異, 精確區間會稍有變化。一般在曲線上的近似直線段范圍內較為準確.
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