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如何減少人ELISA試劑盒操作誤差?

發布時間: 2021-12-13  點擊次數: 162次
  在人ELISA試劑盒的實驗操作中,誤差可分為系統誤差、偶然誤差和疏忽誤差,一個小小的錯誤想法都會影響實驗。很多人經常因為一個小細節和一個錯誤而未能使實驗成功。那么如何降低實驗出錯的概率呢?除了小心,還有一些重要的點需要注意。
 

人ELISA試劑盒

 

  1、檢驗技術人員應具備實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能夠熟練操作實驗儀器和儀器,具有總結分析問題的能力,及時妥善解決實驗中的突發情況。
  2、使用校準過的微量移液器來消除自然誤差。移液器是否準確對于定量檢測尤為重要。
  3、仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規范操作。不同批次的試劑不得混用。值得改進的地方,只有經過反復測試和確認才能改進。
  4、徹底清洗。如果板沒有徹底清洗,酶標的背景顏色將顯示假陽性。洗滌液應該是新鮮的,可以直接使用。舊洗滌液的背景會增加,也可能出現假陽性。
  5、嚴格控制反應時間。如果反應時間過長,酶會失活;反應時間過短,酶聯物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,產物結構松散不穩定,容易洗掉,容易造成假陰性。
  6、注意人ELISA試劑盒的存放期限。超過保存期限的試劑不能使用。
  7、評價試劑的實用性和穩定性對準確性很重要。試劑使用前,應對樣品進行陰性、陽性對照及重復比對試驗,確定試劑符合要求后方可使用。
  8、嚴格控制顯色時間。如果顯色時間太短,加入終止液后底物偶聯物的量太少,反應終止,容易出現假陰性。如果在顯色所需的時間后顯色,則判斷為假陽性,這可能與試劑本身有關。加入顯色劑后應立即顯色,可能是底色顯色的結果。
  9、準確快速地添加樣品。如果人ELISA試劑盒加樣不準確,則無法確定酶積量,直接影響顯色效果。顯色深度和數值的確定與顯色劑和終止液的用量有關,因此取樣時要小心。對于要求在一定時間內完成加樣的實驗,加樣緩慢,會出現誤差,試劑會長時間暴露,尤其是室溫過高時,存放時間會變長??s短甚至無效。

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